使用WATERS液相色譜柱時需避免哪些情況

更新時間：2020-04-26

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　　WATERS液相色譜柱根據(jù)功能分為HPLC和UHPLC、UPLC柱，根據(jù)內徑大小又有常規(guī)分析柱，、窄徑柱和毛細管柱的類型區(qū)別，其中應用廣泛的液質聯(lián)用儀就是用的窄徑柱。因為分析類的儀器主要致力于對樣品成分的判斷，就需要能夠準確分離少量樣品的內徑較小的色譜柱。

　　WATERS液相色譜柱的儲存液無特殊說明，均為評價報告所示的流動相。在使用前，一定要注意儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中，如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑，應先用10%左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下，否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出，造成堵塞。

　　在使用中一定要避免出現(xiàn)以下的情況：

　　一、避免反沖：一般來說色譜柱不能反沖，只有使用說明書上標明該柱可反沖才可以反沖除去留在柱頭上的雜質。否則會降低柱效。

　　二、避免直接改變溶劑的組成：在需要改變檢測樣品溶液組成時，應逐漸改變溶劑的組成，特別是反相色譜中，不應直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬粗嗳?。且在使用次洗脫能力強的洗脫液沖洗色譜柱時，對流路系統(tǒng)中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右。

　　三、避免壓力和溫度的急劇變化：溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料，因此在調節(jié)流速時應該緩慢進行，以保持內填料的穩(wěn)定性。

　　四、禁止將緩沖溶液長時間存放在色譜柱內：保存時應將柱內充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內靜置過夜或更長時間。

　　五、禁止樣品未經處理直接進入色譜柱：避免將基質復雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內，需要對樣品進行預處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經常更換。

　　六、禁止未經處理直接封存：使用完成之后須使用相宜溶劑進行清潔處理，例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡；當采用鹽緩沖溶液作流動相時，使用完后應用無鹽流動相沖洗；含鹵族元素（氟、氯、溴）的化合物可能會腐蝕不銹鋼管道，不宜長期與之接觸；裝在液相色譜儀上的色譜柱如不經常使用，應每隔4-5天開機沖洗15分鐘。

　　七、避免流動相使用不當而破壞固定相：選擇使用適宜的流動相（尤其是pH），以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一段預柱，分析柱是鍵合硅膠時，預柱為硅膠，可使流動相在進入分析柱之前預先被硅膠"飽和"，避免分析柱中的硅膠基質被溶解。

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